顯微高光譜成像:CytoViva 案例
納米技術(shù)是一個快速發(fā)展的研究和開發(fā)領(lǐng)域。這一發(fā)展催生了對更強大的工具和設(shè)備的需求,特別是在成像和圖像分析方面。
具體來說,研究人員需要能夠快速、輕松地對天然狀態(tài)下的目標納米結(jié)構(gòu)進行成像、表征和映射,而無需染色和相關(guān)的樣品制備。
CytoViva通過將 Specim 的世界一流的光譜儀與其專利的增強型暗場 (EDF) 顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)和定制的高光譜圖像分析軟件相結(jié)合,解決了這一需求。
一、高光譜成像如何在納米尺度上發(fā)揮作用?
下圖展示了 Specim 高光譜分辨率V10E 可見近紅外 (VNIR) 光譜儀與 CytoViva EDF 顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)相結(jié)合的強大功能。它們以未染色的哺乳動物細胞為特征,這些細胞暴露于用靶向蛋白功能化的金納米粒子 (AuNP)。金納米粒子是直徑為 1 至 100 納米的小金粒子。
圖 1 是細胞中 AuNP 的高光譜圖像,每個納米級圖像像素包含 VNIR 光譜響應(yīng)。該圖像由安裝在 Olympus BX-43 顯微鏡框架上的 CytoViva EDF 照明器使用 60X 油鏡收集。
使用 Specim 高光譜相機和 CytoViva 專有的數(shù)據(jù)采集軟件以線掃描方式對細胞進行成像。自動顯微鏡載物臺將樣本圖像移動到集成了 Specim sCMOS 相機的 Specim V10E 光譜儀的狹縫上,從而創(chuàng)建高光譜數(shù)據(jù)立方體。
圖 2 是右上角其中一個細胞的放大圖像。這些圖像體現(xiàn)了 CytoViva 的 EDF 顯微鏡照明技術(shù)的強大功能,因為它們可以生成嵌入細胞的納米級實體的極高信噪比圖像。

圖 1. 細胞中 AuNP 的高光譜圖像
圖 2. 細胞中 AuNP 的放大圖像
圖 3顯示了使用該系統(tǒng)可以收集和分析的光譜數(shù)據(jù)。白色曲線代表細胞,紅色曲線代表功能化納米粒子的獨特光譜指紋。
光譜指紋可以對樣品中的納米顆粒進行映射(見圖 4)。細胞的光譜響應(yīng)可進一步用于過濾映射輸入數(shù)據(jù),以防止誤報。
圖 3 細胞(白色)和 AuNPS(紅色)光譜示例
圖 4 細胞(白色)和 AuNPS(紅色)光譜示例
二、世界各地的研究人員都依賴高光譜顯微鏡
全球數(shù)百家領(lǐng)先的研究實驗室使用 CytoViva 的高光譜顯微鏡系統(tǒng)結(jié)合 Specim 的光譜儀和高光譜相機來觀察 1 至 100 納米的納米材料與細胞、組織和其他基質(zhì)的相互作用。使用 CytoViva 高光譜顯微鏡系統(tǒng)生成的數(shù)據(jù)已發(fā)表在 1,600 多種科學(xué)期刊上。
CytoViva 的系統(tǒng)支持納米藥物輸送、納米生物傳感器開發(fā)以及納米材料合成和表征等應(yīng)用。可觀察的納米材料包括金屬、金屬氧化物、碳納米管、聚合物和脂質(zhì)基材料。CytoViva 的高光譜顯微鏡還針對新的臨床應(yīng)用和診斷進行了開發(fā),例如用于尋找癌細胞的液體活檢。

圖 5. Specim ImSpector V10E 光譜儀
文章轉(zhuǎn)載于:Specim高光譜成像(https://mp.weixin.qq.com/s/pAcgT__-LB1xaunQchwC6A)